SD大鼠骨髓间充质干细胞简单介绍：
骨髓原始间充质干细胞(SD大鼠骨髓间充质干细胞)是骨髓基质干细胞，是人们在哺乳动物的骨髓基质中发现的一种具有分化形成骨、软骨、脂肪、神经及成肌细胞的多种分化潜能的细胞亚群。它们对骨髓中的造血干细胞（HSC）不仅有机械支持作用，还能分泌多种生长因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）来支持造血。
常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法，(SD大鼠骨髓间充质干细胞)全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同，分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入，又有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化。但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题，加之成本较高和技术的难度，在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。
常见分离方法
目前BMSCs的分离方法主要有:
✦ 贴壁分离法：根据BMSCs的粘附特性来实现分离贴壁的方法；
✦ 密度梯度离心法：根据BMSCs与其他细胞的密度不同来分离的方法；
✦ 流式细胞仪分离法：根据细胞大小或者根据细胞表面的一些特殊标志来分离的方法。
密度梯度离心法与流失细胞仪分离法价格昂贵且操作复杂、容易导致细胞大量流失，应用相对较少。贴壁培养法应用最早，具有操作简单，对细胞干扰少，不易发生污染等特点较为广泛应用，其缺点是细胞纯度较低，但有关研究表明，BMSCs细胞扩增到P1、P2代后细胞的纯度分别可达到95%、98%。
大鼠骨髓间充质干细胞细胞传代能力测试
批次323363
大鼠骨髓间充质干细胞生长快速，高密度会影响细胞干性，建议按照1:3比例传代细胞，传代建议使用胰酶浓度为0.05%进行消化。消化每t25培养瓶加胰酶1ml。消化时间约1-2min内，t25培养瓶培养液约7ml完全培养基。
本次验证：传代图如下（4X）
P1-P5代，按照1:3比例传代，48H(隔天)传代一次。每次细胞状态和增殖能力均良好。
P6-p8代1:3传代，72h（隔两天）传代一次。
P8-P10代1:3传代，144h（隔6三天）传代一次。
此时细胞个体变大，生长速度明显减慢。
SD大鼠骨髓间质干细胞质检报告
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细胞形态图：
细胞处于快速分裂的状态，良好的MSCs显示较小的纺锤状的形态，伴有较多的折光的双联体，为新的正在分裂的细胞。细胞首代状态较好，多数呈长梭形生长，部分不规则，极性良好，经传代 5次后，细胞仍较有活力。以1:2 的分种率传代，约48h可长满。
分化测试
1. 成脂诱导分化
细胞汇合度约达 80%时，加入间质干细胞成脂诱导液后，细胞回缩较明显。11 天后已有大量脂滴出现，培养21天后进行油红O 染色，可见被染为红色的较标准的脂滴。
油红O染色试剂盒描述：
油红O是一种脂溶性重氮染料，用于染色细胞和组织中的脂质和脂肪沉积物。虽然样品可能是新鲜的，冷冻的或福尔马林固定的，但油红O与石蜡包埋的组织切片不相容。观察油红O沉淀是正常的。因此，必须使用Whatman纸或注射器驱动的过滤器单元通过过滤新鲜制备工作溶液。
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2.成骨诱导分化
细胞汇合度约达 70%时，加入间质干细胞成骨诱导液，诱导 21 天可见钙结质，进行茜素红染色鉴定， 茜素红与类骨质结合，形成同心圆状的深红色小结节。
茜素红S染色试剂盒描述：
茜素红S （Alizarin Red S,简称ARS ）作为一种染料型配位剂在分光光度分析方面已有了广泛的应用。近年来，很多作者把 ARS 及其金属配位物在*电极上的吸附催化波用于电分析中，提高了测定的灵敏度和选择性。货号：0223，可点击官网咨询查看哦！
3.成软骨细胞分化
细胞汇合度约达 70%时，加入间质干细胞成骨诱导液诱导 21 d 后，使用甲苯胺蓝染色可见较广泛的细胞外基质蓝紫色，尤其在细胞堆积区，图中为细胞密度稍低的区域也可见明显的异染颗粒。
阿利新蓝染色试剂盒描述：
阿尔辛蓝是一种用于检测细胞软骨形成的染料，它可以染色软骨组织中的硫酸化蛋白多糖。阿尔辛蓝染色试剂盒含有1%的阿尔辛蓝溶液，0.1%的核固红，方便，即用型溶液。在pH 2.5时，阿尔辛蓝染色酸性粘多糖并显示蓝色，而核固红染色核粉红色至红色，细胞质淡粉红色。货号：8378，可点击官网咨询查看哦！
表面分子流式检测
CD29:来源 THermoFisher PE
CD90:来源 THermoFisher PE
CD45:来源 THermoFisher FITC
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上海中乔新舟生物科技有限公司
1、原代细胞：人脐静脉内皮细胞、人脐带间充质干细胞、人脂肪间充质干细胞、iPS诱导多能干细胞（可提供细胞流式及免疫荧光鉴定报告，需签订MTA协议）。
2、培养基：原代细胞专用低血清、无血清、无异源蛋白无动物成分培养基。
3、细胞培养试剂：胎牛血清、原代细胞转染试剂盒、细胞实验检测试剂盒、细胞生长因子、ELISA试剂盒、定量PCR芯片试剂盒、DNA/RNA及细胞裂解物等。
4、细胞系（株）：种类丰富，已通过STR鉴定；提供细胞株完全培养基。
5、自研产品：支原体检测/清除试剂盒、端粒酶检测试剂盒、人源/动物源ELISA试剂盒等系列产品。
6、技术服务：细胞荧光标记服务（GFP/RFP/LUC）、干扰/过表达稳转株构建、细胞基因敲除、细胞系鉴定服务（STR）、原代细胞永生化、肿瘤细胞耐药株构建、原代细胞分离等。