链霉亲和素的作用及使用方法
链霉亲和素是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质,天然形成为思源四聚体,分子量约60kD。以生物素-链霉亲和素为配体-受体模型探讨了不同表面密度的生物素与链霉亲和素的相互作用。那么,链霉亲和素的作用具体有哪些呢?
链霉亲和素与生物素的相互作用:
以生物素-链霉亲和素为配体-受体模型探讨了不同表面密度的生物素与链霉亲和素的相互作用.通过生物素修饰的功能化聚乙二醇与表面自组装的胺基官能团的反应制备了不同表面密度的生物素仿生基体,进而实现链霉亲和素在生物素修饰的固体表面的特异性吸附.结果表明,聚乙二醇的存在有效地抑制了链霉亲和素的非特异性吸附;在生物素表面密度较低时,链霉亲和素以单分子形式吸附在表面的特定区域;当生物素表面密度达到80%时,吸附的链霉亲和素达到饱和并形成均匀的单分子层.同时,研究结果也为研究单分子相互作用提供了理想的模型.
链霉亲和素使用方法:
本产品为冻干粉,含微量磷酸钠盐,链霉亲和素在高浓度时、冻干过程中或反复冻溶条件下易 形成不溶的聚集体。推荐以纯水溶解冻干粉至 5-10 mg/ml 浓度,如见溶液略呈浑浊,可经 16000 g 离心 5 分钟去除不溶物。不溶物含量很少,不影响产品有效成分的含量及使用。配置好的溶液可分 装为适宜体积,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融,其活性至少可保持半年。如欲在 4℃下保存溶 液,可添加适量防腐剂(如 0.05%叠氮钠)以避免微生物生长,并于 2 周内用完。
链霉亲和素注意事项:
链霉亲和素是一种高度稳定的蛋白质,可抵抗蛋白酶消化、极端 pH 和温度、以及较高浓度的变 性剂和去污剂。常用的蛋白质浓度测定方法,如 Lowry 法、Bradford 法和 Biuret 法等,其染料难 以有效结合链霉亲和素,难以准确定量链霉亲和素,推荐采用 280 nm 光吸收值测定其浓度。