胆碱酯酶(Cholinesterase,ChE)是一类催化酰基胆碱水解的酶类,又称酰基胆碱水解酶。根据底物特异性和抑制剂敏感性不同,可将其分为两类,一类是乙酰胆碱酯酶(AchE,EC 3.1.1.7,又称真性胆碱酯酶,特异性胆碱酯酶),负责水解乙酰胆碱酯;另一类是丁酰胆碱酯酶(BchE,EC 3.1.1.8,又称血清胆碱酯酶,假性胆碱酯酶,非特异性胆碱酯酶),负责水解分子量较大的芳基或烷基胆碱酯,如丁酰胆碱和苯甲酰胆碱。
分布与生理功能
乙酰胆碱酯酶由神经细胞和骨髓新生红细胞合成,主要分布于脑灰质、神经节内的神经细胞和神经肌肉接头等神经组织中,在红细胞、血清等非神经组织中也有分布。乙酰胆碱酯酶的主要生理功能是高效水解神经末梢释放的乙酰胆碱,保证神经冲动在突触间的正常传导。
丁酰胆碱酯酶由肝脏粗面内质网合成,广泛分布于血清中,在肝脏、肺脏、脾脏等组织中也有分布。丁酰胆碱酯酶半衰期约为10d,较白蛋白半衰期21d短,可灵敏反映肝细胞蛋白质合成能力的变化,因此其活性是临床诊断肝病的重要生物指标之一。丁酰胆碱酯酶的异常过表达与阿尔茨海默病高度相关,该病患者血清中丁酰胆碱酯酶活性明显高于正常水平,而丁酰胆碱酯酶抑制剂可有效缓解患者症状。丁酰胆碱酯酶能够与有机磷及氨基甲酸酯类农药结合,清除其对生物体的毒害作用。
检测原理
乙酰胆碱酯酶水解胆碱酯类的速度为:乙酰胆碱>丙酰胆碱>丁酰胆碱,有研究表明,使用乙酰胆碱作为底物测得的乙酰胆碱酯酶活性是使用丁酰胆碱作为底物测得活性的30~100倍。因此,可使用乙酰胆碱作为底物检测乙酰胆碱酯酶活性,使用丁酰胆碱作为底物检测丁酰胆碱酯酶活性。
乙酰胆碱酯酶催化乙酰胆碱水解生成胆碱,丁酰胆碱酯酶催化丁酰胆碱水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412nm吸光度增加速率,计算两种酶的活性。
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温馨提示
索莱宝生化试剂盒货号以“0”、“5”结尾,分别代表两类反应体系。以“0”结尾的代表试剂盒所用方法为分光光度法(反应体系约1mL),可以用分光光度计进行检测;以“5”结尾的试剂盒代表所用方法为微量法(反应体系约0.2mL),可以用分光光度计或者酶标仪进行检测。