产品信息

产品描述

Hieff NGS^® MaxUp Human rRNA Depletion Kit (rRNA & ITS/ETS)利用RNase H消化法去除人、小鼠和大鼠来源总RNA中的核糖体RNA和45S ITS/ETS区域以保留信使RNA (mRNA)和其它非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA（如FFPE RNA）均具有良好的rRNA去除效果。由于降解的FFPE样本相比新鲜组织样本通常含有较高比例的ITS/ETS，该试剂盒人、小鼠和大鼠45S ITS/ETS区域的探针，经该试剂盒去除后可显著提高测序结果中有效数据比例。

适用范围

适用于人、小鼠和大鼠来源的100 ng~1 μg总RNA样品；适用于完整或部分降解RNA（如FFPE RNA）样品。

产品组分

组分编号和名称			12257ES24	12257ES96
12257-A		Hybridization Buffer	72 μL	288 μL
12257-B		Human Probe Mix (rRNA & ITS/ETS)	48 μL	192 μL
12257-C		RNase H Buffer	72 μL	288 μL
12257-D		RNase H	48 μL	192 μL
12257-E		DNase I Buffer	660 μL	2×1320 μL
12257-F		DNase I	60 μL	240 μL

运输与保存方法

干冰运输，-20 °C存放。有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM 高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. RNA样品最大投入体积为10 μL，若样品体积较大，可先进行浓缩。
4. RNase H 消化步骤如需配Mix使用，请现配现用。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 本产品仅作科研用途！

自备材料

1. RNA纯化磁珠：Hieff NGS^® Cleaner (Cat#12602)或其他等效产品。

2. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff^® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) (Cat#11201)或其他等效产品。

3. 其他材料： 无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针和杂交Buffer从-20 °C 取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至10 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表1 探针杂交反应体系