G5 High-Fidelity DNA Polymerase
产品名称: G5 High-Fidelity DNA Polymerase
英文名称: G5 High-Fidelity DNA Polymerase
产品编号: HZ3201
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: 沪震生物
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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G5 High-Fidelity DNA Polymerase
描述:该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计, 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 反 转录酶、Rnase Inhibitor,在 RNA 的 LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA 的 LAMP 扩增。除此外,Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品,以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP、 Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样 品为红色;2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测;2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管(阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色,A3821)。 货 号 名 称 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意:Bst4.0+ Polymerase:2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase、20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor、22%海藻糖,不含甘油,可用于冻干。 储存:长期保存于-20℃,可保存 2 年。短期保存置于 4℃, 保存 3 个月,避免反复冻融。 使用方法: 1. 配制反应体系 在 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、 LoopF/B 分别为 4 μM、F3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后,置于 60~68°C(首次实验采用 65°C) 进行反应 20~45min。 3. 引物及酶制品的冻干(可参考) Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理,获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 的 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品,并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。
G5超保真DNA聚合酶是一种具有超高保真性能和卓越扩增活性的DNA聚合酶,它具有3’-5’的校正活性,保真度为Taq DNA聚合酶的100多倍。 另外,该酶具有5~6kb/min的快速延伸速度,可快速高效的获得PCR产物。基于其扩增能力强、产量高、保真性高等优势,可广泛应用于载体构建、突变修复、基因合成、DNA测序等高保真要求较高类型的试验。该酶扩增获得的产物不含有”A”尾,可直接连接入pEZ-Blunt-Zero平端载体进行克隆测序。 | ||||||||
包装 | ||||||||
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单位定义 |
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一个活力单位即在74°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。 | ||||||||
应用 |
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高保真扩增、载体构建、克隆测序 | ||||||||
储存 |
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-20°C可保存3年,避免反复冻融。 | ||||||||
PCR反应性能 |
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以λDNA为模板,可以很好的扩增20Kb的DN**段;以人类基因组DNA为模板,可以很好的扩增10Kb的DN**段。 | ||||||||
反应实例 |
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Fig. 应用G5 DNA 聚合酶以人基因组为 模板分别扩增6.3kb的DN**段。Marker 为 DNA Marker 10,000 |
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