大肠杆菌BL21 SI菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌BL21 SI菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌BL21 SI菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌BL21 SI菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC275 QSG7701 人肝细胞 人 1640 贴壁

EC276 QGY7701 人肝癌细胞 人 1640 贴壁

EC277 BGEC-823 人胃腺癌细胞（低分化） 人 1640 贴壁

EC280 SMMEC7721 人肝癌细胞 人 1640或DMEM 贴壁

EC281 HL7702 人肝正常细胞 人 1640 贴壁

EC282 HBZY-1 大鼠肾小球系膜细胞EEC 大鼠 DMEM 贴壁

EC283 H9 人T淋巴细胞系 人 1640或IMDM 悬浮

EC284 BEL-7404 人肝癌细胞 人 1640或DMEM 贴壁

EC285 P3/ag 小鼠骨髓瘤细胞 小鼠 IMDM 悬浮

EC286 PA317 逆转录病毒包被的NIH3T3细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC287 TB 1 LU 蝙蝠肺细胞 蝙蝠 EMEM 贴壁

EC294 6F-EECM

EC289 BEL-7402 人肝癌细胞 人 1640或DMEM 贴壁

EC290 EChangliver 人张氏肝细胞 人 1640 贴壁

EC291 MGEC80-3 人胃癌细胞 人 1640 贴壁

EC292 HO8910 人卵巢癌细胞 人 1640或DMEM 贴壁

EC368 H22 小鼠肝癌细胞 小鼠 1640 悬浮

EC369 EC33A 人宫颈癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC315 KM-12-SM 人结肠癌肝转移细胞 人 5A/DMEM 贴壁

EC293 KECL-22 人慢性髓样白血病细胞 人 IMDM 悬浮

EC308 Het-1A 人食管上皮细胞 人 1640 贴壁

EC297 SU-DHL-4 人类B细胞淋巴瘤细胞 人 IMDM 悬浮

EC298 SNU-216 人胃癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC370 SK-BR-3 人乳腺癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC310 GP2-293 人胚肾上皮包装细胞 人 DMDM 贴壁