普鲁士蓝染色原理

      普鲁士蓝染色（Perls stain）又称含铁血黄素染色，及经过亚铁氰化钾与稀酸反应呈现蓝色；主要针对于三价铁，是一种经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法；染色原理是亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应生成一种不溶解的蓝色化合物，称之为普鲁士蓝染色。三价铁的亚铁氰化物是一种稳定的化合物，反应后亦可用其他染色剂进行复染（核固红，伊红等）

普鲁士蓝应用

      普鲁士蓝常用于显示组织内各种出血性病变，常见于吞噬细胞内，可用来观察组织细胞中有无铁元素存在，以及铁元素存在的位置及含量。

在临床检测上的应用有：

① 显示和证明组织内局部出血的各种出血性病变；

② 显示慢性心衰时的肺淤血和心衰细胞（铁阳性巨噬细胞)；

③ 证明和区分含铁血黄素和其他色素沉着，注意正常骨髓和脾脏中常见被染色的三价铁离子。

普鲁士蓝染色实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水；

2、普鲁士蓝染色：染色液等比例混合，切片入染液中染色1h，蒸馏水洗2遍；

3、复染：核固红染色3min，流水冲洗；

4、脱水封片：切片入无水乙醇 3 缸脱水，各 5min，二甲苯透明 5min，中性树胶封片；

5、显微镜镜检，图像采集分析。

注意事项

1、切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

2、整个操作过程中容器要干净，避免用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。Perls stain 染色时，应根据样本情况调整着色时间。

3、所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。

结果判读

铁离子呈蓝色，细胞核红色

送样运输要求

样本放置于10倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输（勿冷冻结冰）；

2. 石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。