酿酒酵母Y187菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 酿酒酵母Y187菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。酿酒酵母Y187菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 酿酒酵母Y187菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC914 RASMCs 大鼠气道平滑肌细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC915 OSK-1 小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞) 小鼠 DMEM 贴壁

EC916 B35 大鼠中枢神经细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC917 HCE-2 [50.B1] 人角膜上皮细胞 人 DMEM 贴壁

EC918 ADTC5 小鼠成软骨细胞 小鼠 DMEM/F12 贴壁

EC919 B104 大鼠神经母细胞瘤细胞 大鼠 DMEM 贴壁

EC920 KFB 人肾成纤维细胞 人 EMEM 贴壁

EC921 OSKM-1 小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞) 小鼠 DMEM 贴壁

EC922 hEM15A 人子宫异位内膜上皮细胞永生化细胞 人 EMEM 贴壁

EC923 Capan-2 人胰腺癌细胞 人 DMEM 贴壁

EC924 KMY1022 EB病毒转化的人B淋巴细胞 人 1640 悬浮

EC925 NCI-H727 人肺支气管肿瘤细胞 人 DMEM 贴壁

EC926 RPMI 1788 人外周血B淋巴细胞 人 1640 悬浮

EC927 LTEP-sm 人小细胞肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC928 AHH-1 人外周血额B淋巴细胞 人 IMDM 悬浮

EC929 HDLM-2 人霍奇金淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC930 hTERT-HPNE 人胰腺导管上皮细胞 人 DMEM 贴壁

EC931 L428 人霍奇金淋巴瘤细胞 人 1640 悬浮

EC932 M2-10B4 小鼠骨髓纤维原细胞 小鼠 1640 贴壁