血清/血浆miRNA提取试剂盒 19332ES
产品名称： 血清/血浆miRNA提取试剂盒 19332ES
英文名称： MolPure® Serum/Plasma miRNA Kit 血清/血浆miRNA提取试剂盒
产品编号： 19332ES08
产品价格： 265.00
产品产地： 翌圣生物
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2023-12-14T09:09:49
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 5 T | 265.0 |
| 50T | 1968.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
MolPure® Serum/Plasma miRNA Kit适用于血浆、血清、淋巴液等样品中总RNA和miRNA的提取。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度RNA和miRNA。提取的RNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于RT-qPCR等下游应用实验。
产品信息
|
货号 |
19332ES08 / 19332ES50 |
|
规格 |
5 T /50 T |
组分信息
|
类别 |
组分编号 |
组分名称 |
19332ES08 |
19332ES50 |
|
Part I |
19332-A |
裂解液LB (LB Buffer S3) |
5 mL |
50 mL |
|
Part II |
19332-B |
RNA吸附柱S3 (MolPure® RNA Column S3) |
5 个 |
50 个 |
|
19332-C |
miRNA吸附柱S3 (miRNA Column S3) |
5 个 |
50 个 |
|
|
19332-D |
2 mL收集管 (2 mL Collection Tube S3) |
10 个 |
100 个 |
|
|
19332-E |
去蛋白液PL* (PL Buffer S3*) |
1.2 mL |
12 mL |
|
|
19332-F |
漂洗液W* (Wash Buffer S3*) |
1.3 mL |
13 mL |
|
|
19332-G |
RNase-free H2O |
1 mL |
5 mL |
储存条件
Part I组分冰袋运输，4℃避光保存。Part II组分常温运输，常温保存。产品有效期12个月。
注意事项
1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. 漂洗液W*添加乙醇后，易形成沉淀，不影响使用。使用时，吸取上清即可。
3. 裂解液LB和去蛋白液PL*含有刺激性物质，为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4. 本产品仅作科研用途！
使用说明
使用前准备
1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，氯仿、无水乙醇，RNase-free离心管等。
2. 除特殊指明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到12,000 rpm转速的传统台式离心机。
3. 首次使用前，在去蛋白液PL* 和漂洗液W*瓶中参照下表加入指定体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。
|
编号 |
组分名称 |
5 T规格无水乙醇加入量 |
50 T规格无水乙醇加入量 |
|
19332-E |
去蛋白液PL* |
2.8 mL |
28 mL |
|
19332-F |
漂洗液W* |
5.2 mL |
52 mL |
操作方法
一、样本预处理：
1. 取250 μL血清或血浆等液体样本转移至1.5 mL的RNase-free离心管中。
【注】：不足 250 μL时，需用PBS或生理盐水补足。
2. 加入750 μL裂解液LB，反复吹打，并剧烈振荡混匀。
3. 室温（22-30℃）静置5 min。
4. 加入200 μL 氯仿（自备），剧烈振荡15 sec混匀。
5. 室温静置2 min。
6. 4℃ 12,000rpm 离心10 min，使样品分层。取上层水相转移至1.5 mL的RNase-free离心管中。
【注】：样品会分为三层，下层为有机相，中间层和上层无色的水相，RNA存在于上层水相中。
【注】：上层容量约为所加裂解液LB总量的70%。如加入750 μL 裂解液LB，上层水相约为525 μL。建议吸取500 μL，以防吸到中间层造成DNA污染。
二、（推荐）总RNA（含miRNA）提取方法：
1. 将RNA吸附柱S3套入2 mL收集管中，备用。
2. 加入1.5倍上层水相体积的无水乙醇（自备）至上层水相，吹打混匀。
【注】：出现沉淀属正常现象。
【注】：无水乙醇必须是室温保存。
3. 将上述混合液加入到RNA吸附柱S3中，12,000 rpm离心1 min，弃掉废液。
【注】：混合液每次最大加入体积650 μL，可分多次离心。
【注】：离心后，若滤膜仍有液体残留，可延长离心时间至5 min。
4. 加入700 μL去蛋白液PL*，12,000 rpm离心30 sec，弃废液。
【注】：确保去蛋白液PL*已添加无水乙醇。
5. 将RNA吸附柱S3放回收集管，加入500 µL漂洗液W*，12,000 rpm室温离心30 sec，弃废液。
【注】：确保漂洗液W*已添加无水乙醇。
6. 重复一遍步骤5。
7. 将RNA吸附柱S3放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，以除去残留的漂洗液W*。
8. 将RNA吸附柱S3放入新的1.5 mL RNase-free离心管中，在RNA吸附柱S3中央加入30-50 µL RNase-free H2O，室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1 min。收集滤液，即为RNA溶液。
【注】：可通过以下方式提高回收产量：①65℃预热RNase-free H2O；②将RNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。
9. RNA溶液可置于-80℃长期保存。
三、仅当miRNA提取量不理想时，可尝试用miRNA富集方法：
1. 将RNA吸附柱S3和miRNA吸附柱S3分别套入2 mL收集管中，备用。
2. 加入0.5倍上层水相体积的无水乙醇（自备）至上层水相，吹打混匀。
【注】：无水乙醇必须是室温保存。
3. 将上述混合液加入到RNA吸附柱S3中，12,000 rpm离心1 min，收集滤液。并将滤液转移至新的RNase-free离心管中。
【注】：混合液每次最大加入体积650 μL，可分多次离心。
【注】：miRNA在滤液中，吸附柱上为去除miRNA的总RNA。
4. 计算滤液体积，加入0.65倍体积室温保存的无水乙醇，吹打混匀。
5. 将上述混合物加入miRNA吸附柱S3中，12,000 rpm离心1 min，弃掉滤液。
【注】：混合液每次最大加入体积650 μL，可分多次离心。
【注】：离心后，若滤膜仍有液体残留，可延长离心时间至5 min。
6. 按照总RNA（含miRNA）提取方法步骤4~9漂洗，获取miRNA。
【注】：此操作中，步骤4~9用到的离心柱应为miRNA吸附柱S3。
Ver.CN20231114