shRNA表达载体构建

shRNA（short hairpin RNA, shRNA）是一段小发卡或短发卡RNA序列，一般长19~23bp，常被用于RNA干扰沉默靶基因的表达。利用载体把shRNA导入细胞，载体中的U6或H1启动子确保shRNA的表达；shRNA的发卡结构可被细胞机制切割成siRNA，然后siRNA结合到RNA诱导沉默复合物上（RNA induce

-d silencing complex，RISC），该复合物能够结合到目的mRNAs并将其降解。通过载体可以将shRNA整合到细胞基因组中，从而使细胞长期稳定表达shRNA。

百恩维生物可提供多种shRNA表达载体，如慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、以及普通的真核表达载体等；同时也有多种荧光报告基因可供选择，如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等；另外还有药筛基因可供选择：Puromycin、Neomycin等，用于后期构建稳定表达shRNA的细胞株。

百恩维生物可以构建常规的1条shRNA干扰表达载体，也可在同一个表达载体中构建多条shRNA（百恩维生物的专利技术），干扰效果更强。

您只需告诉我们您需要干扰的目的基因，我们就会为您设计相应高质量的shRNA序列信息，其干扰效率保证大于70%。

技术服务内容如下：

1、接受客户目标基因信息； 

2、分析目标基因，并设计高质量的shRNA序列； 

3、PCR退火形成shRNA双链； 

4、将shRNA双链克隆至含有U6或H1启动子的表达载体上； 

5、测序以确保插入序列的正确性； 

6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。

shRNA表达载体图谱（在此列举2个）：