昂飞芯片-人基因组primeview基因表达谱芯片服务
产品名称: 昂飞芯片-人基因组primeview基因表达谱芯片服务
英文名称: affymetrix primeview
产品编号:
产品价格: 3200-3500
产品产地: null
品牌商标: null
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
- 地址 : 浙江省杭州市余杭塘路866号纳米楼220
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有任何问题请联系zjubell#hotmail.com(将#替换成@即可),或者电话0571-88208345 或0571-88208345 洪老师
人类的基因组芯片,型号为GeneChip PrimeView Human Gene Expression Array,总共约有3.6万个转录本,2万个有良好注释的基因。
客户只需要提供组织、细胞、即可,从提RNA到纯化、质检、芯片杂交扫描及分析,我们都会为您完成。
a样品寄送,组织块建议用干冰或液氮运输;细胞建议放在trizol中4度或干冰运输都可。RNA最好溶解在RNase free的水中干冰运输(如果路程小于30分钟,可以直接放普通冰上运输)
(送样要求:RNA实验只需要200ng的总RNA即可,浓度不低于70ng/ul, 考虑到QC以及重复需要,希望提供10ul以上的总RNA。260/280希望在1.8-2.2之间。260/230最好在2.0以上,尽量不低于1.0)
b RNA提取与质检,我们采用最先进的Agilent bioanalyzer跑电泳。(下图为DNA电泳模拟图,RNA原理同DNA)
电泳结果如下图:18S,28S的比值,5S的区域,浓度以及模拟电泳图
c 芯片杂交与洗涤
判断芯片是否成功的一些知识:
1. - 四条边明暗交替模式、拐角棋盘模式
- 左上角芯片名称清晰
2.背景平均值(Average Background)和噪音值(Noise Values)
典型的背景平均值范围在 20 到 100 之间。
来源于相同扫描仪应该有可比较的噪音值。
结果显示在.rpt 文件中。
3) Poly-A Controls: lys,phe,thr,dap
Poly-A RNA Controls 用来监控全程的标记过程. lys,phe,thr,dap 的 3’端都应该表达
(Detection 为 P)。结果显示在.rpt 文件中。
4) 杂交对照:bioB,bioC,bioD,and cre
bioB,bioC,bioD 代表 E.coli.生物素合成通路中的基因。bioC,bioD,and cre 应该总是检测到
并以递增的信号强度表达,来反映它们相对的浓度。结果显示在.rpt 文件中。
5) 内参照基因 Sig(3’/5’)比值检测
对于大多数的表达芯片,ß-Actin 和 GAPDH 两个基因被用来评估样品制备的质量。二者
探针组的 3’/5’比值至少一个小于 3。ß-Actin 和 GAPDH 的 3’/5’比值显示在.rpt 文件中。
6) 总体基因的表达率不能低于 20%。
7) RNA, cRNA QC 电泳图 符合质控要求
d 数据分析
信号通路分析
信号通路网络分析
聚类分析