ChIP染色质免疫共沉淀技术服务
产品名称: ChIP染色质免疫共沉淀技术服务
英文名称: ChIP chromatin immunoprecipitation technique service
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产品价格: 6800
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本公司与上海正规三甲医院科研工作室合作,正式对外推出ChIP染色质免疫共沉淀技术服务,有需要的同学请来电预约,13661449330,宋老师,QQ2293446234,邮箱:songjing1214@sina.cn.
染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,利用该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰以及转录因子与基因表达的关系。将ChIP与第二代测序技术相结合的ChIP-Seq技术,能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段。
ChIP 实验操作流程:
1 、样品准备与交联
细胞收集后,用37%的formaldehyde处理细胞,交联核酸与DNA结合蛋白;
2. 超声打断染色质
裂解细胞,用Bioruptor将染色质超声破碎成200-1000bp片断;将片段分为两份,一份用于免疫共沉淀,一份用于对照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗体复合物。
4 、解交联及纯化 DNA
将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA片段,并进行纯化(IP DNA);B步骤所得用于对照(Input DNA)的片断作不进行IP实验,但也要解交联并纯化。
5 、 DNA 段 PCR 扩增
针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。
6 、结果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]