大肠杆菌MDS42 recA trfA菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌MDS42 recA trfA菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌MDS42 recA trfA菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌MDS42 recA trfA菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC015 R 1610 仓鼠肺细胞 中国仓鼠

EC016 V79 仓鼠肺细胞 中国仓鼠 DMEM 贴壁

EC017 CHO/dhFr- 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 中国仓鼠 F12K 贴壁

EC018 CHO-K1 仓鼠卵巢细胞亚株 中国仓鼠 F12K 贴壁

EC019 CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞 中国仓鼠

EC020 Lec1 仓鼠卵巢细胞 中国仓鼠

EC021 HMy2.CIR 人B淋巴母细胞 人 IMDM 悬浮

EC022 hFOB 1.19 人SV40转染成骨细胞 人 1640 贴壁

EC023 HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞 人 1640 贴壁

EC024 EA.hy926 人脐静脉细胞融合细胞 人 DMEM 贴壁

EC025 WISH 人羊膜细胞 人 EMEM 贴壁

EC026 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞 人 F12K 贴壁

EC027 SV-HUC-1 人输尿管上皮永生化细胞 人 F12K 贴壁

EC028 293 [HEK-293] 人胚肾细胞 人 DMEM 贴壁

EC029 293 Cells, low passage 人胚肾细胞 人

EC030 293T 人胚肾细胞 人 DMEM 贴壁

EC031 293T/17 人胚肾细胞 人

EC032 2V6.11 人胚肾细胞 人

EC033 AAV-293 人胚肾细胞 人 DMEM 贴壁

EC034 HFL1 人胚肺成纤维细胞 人 MEM

EC035 MRC-5 人胚肺细胞 人 DMEM 贴壁

EC036 WI-38 人胚肺细胞 人 MEM 贴壁

EC037 WPMY-1 人正常前列腺基质永生化细胞 人

EC038 Pt K1 (NBL-3) 袋鼠肾细胞 长鼻袋鼠

EC039 Ana-1 小鼠巨噬细胞 小鼠 1640 悬浮