蔗糖磷酸合成酶测定试剂盒产品内容：
提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存； 
试剂一：液体5mL×1瓶，-20℃保存； 
试剂二：1000μg/mL蔗糖溶液1mL×1瓶，4℃保存； 
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存； 
试剂四：液体40mL×1瓶，4℃保存； 
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；
产品说明：
蔗糖不仅是重要的光合产物，也是植物体内运输的主要物质，还是碳水化合物的贮存形式之一。蔗糖磷酸合成酶（SPS）以果糖-6-磷酸为受体，形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖***合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
蔗糖磷酸合成酶测定试剂盒操作步骤：	
一、测定样品提取：   
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。   
二、测定操作表：
 
按下表操作：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
标准管
空白管
样本  
30
30
 
 
蒸馏水
 
150
150
180
试剂一
150
 
 
 
试剂二
 
 
30
 
混匀，25℃准确水浴10min
试剂三
50
50
50
50
沸水浴中煮沸10min左右（盖紧，以防止水分散失），冷却
试剂四
700
700
700
700
试剂五
200
200
200
200
混匀，80℃水浴保温10min，冷却后，以蒸馏水调零。在480nm下测定各管吸光值。
计算△A测= A测定管-A对照管，△A标=A标准管-A空白管
 
 
三、蔗糖磷酸合成酶测定试剂盒SPS活力单位的计算：
1、 按照蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS活性(μg/min/mg prot)=（C标准管×V1×△A测÷△A标）÷(V1×Cpr)÷T=100×△A测÷△A标÷Cpr
2、 按照样本鲜重计算
单位定义：每g组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS活性(μg/min /g鲜重)= (C标准管×V1×△A测÷△A标）÷(W×V1÷V2)÷T=100×△A测÷△A标÷W
C标准管：标准管浓度，1000μg /mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.03mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；T：反应时间：10min。
3、尽量在30min内完成测定。
 
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