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杭州锐创生物技术有限公司
WNT信号通路基因检测技术服务

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产品名称: WNT信号通路基因检测技术服务

英文名称: WNT signal pathway expression services

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保守的 Wnt/β-Catenin 通路调节干细胞的多能性,并且在发育过程中决定细胞的分化命运。这种发育性级联整合其他通路的信号,包括视黄酸、成纤维细胞生长因子 (FGF)、转化生长因子 β (TGF-β) 和骨形态发生蛋白 (BMP),存在于各种不同的细胞类型和组织。Wnt 配体是一种分泌型糖蛋白,可结合 Frizzled (卷曲)受体,然后与 LRP5/6 一起在细胞表面形成一个更大的复合体。卷曲受体被 ZNRF3 和 RNF43 泛素化,二者的活性可通过 R-spondin 结合到 LGR5/6 而受到抑制。通过这种方式 R-spondin 可增加细胞对 Wnt 配体的敏感性。Wnt 受体复合体激活后触发多功能激酶 GSK-3β 从一个调节性 APC/Axin/GSK-3β 复合体上解离下来。Wnt 信号缺失时(断开状态),β-catenin 是一种完整的 E-钙黏蛋白并作为细胞间黏附接头蛋白和转录共调节分子,并且在 CK1 和 APC/Axin/GSK-3β 复合体协调磷酸化后作为靶标,通过 β-TrCP/Skp 通路导致其泛素化和被蛋白酶体降解。Wnt 配体存在时(通路状态),共同受体 LRP5/6 被带入复合体与 Wnt 结合的卷曲蛋白一起。这样就导致蓬松蛋白 (Dvl) 相继磷酸化、多聚泛素化和聚合后被激活,并从 APC/Axin 上将 GSK-3β 取代,机制不详,可能有底物捕获和/或内体隔离。稳定的 β-catenin 通过 Rac1 和其他因子转运入核,在胞核内结合 LEF/TCF 转录因子,取代辅助抑制因子并对 Wnt 的靶标基因招募额外的辅助激活因子。此外,β-catenin 与其他几个转录因子协作调节特定的靶标。重要的是,研究者已发现人类肿瘤中的 β-catenin 点突变,可阻止 GSK-3β 磷酸化并导致后者异常聚集。在肿瘤标本中 E-钙黏蛋白、APC、R-spondin 和 Axin 突变也有记录,更加突出癌症中这条通路的异常。还有证据显示 Wnt 信号可促进核内癌症相关的其他转录调节分子的聚集,例如 TAZ 和 Snail1。此外,GSK-3β 也参与葡萄糖代谢和其他信号通路,这表示它的抑制与糖尿病和神经退行性病变相关。



RNA电泳,判断RNA的降解程度,应用于基因芯片、高通量转录组测序、普通RT后的定量分析。
检测灵敏度,定量:25ng/ul; 定性:5ng/ul


DNA电泳,可以准确判断杂峰等现象,同时对弥散的DNA条带进行范围鉴定,可以对低至0.1ng的DNA进行电泳判断,应用于高通量测序前的样品、文库QC。
 

应用举例:
1. RNA QC 分析
RNA 样品的完整性在 微阵列基因表达分析技术 中是至关重要的。RNA 样品也用于构建 cDNA 库、RT-PCR 、体外翻译、核糖核酸酶(RNase) 保护检测、Northern blotting等其它应用。当样品的 RNA含量非常低时,就会面临一种特殊挑战,例如通过 显微解剖 分离出来的RNA 或者来自低丰度的诸如果蝇的 RNA。因为核糖核酸酶(RNase)是普遍存在的,所以您必须检测总 RNA 或者信使 RNA 样品的质量。芯片实验室技术可以使您更加轻松和快速地分析您的样品。只需要加入RNA 样品,启动芯片运行,然后观察实时数据显示即可。仅需要5 ng总 RNA (RNA 6000 Nano 芯片实验室试剂盒)或者200 pg总RNA(RNA 6000 Pico 芯片实验室试剂盒),系统就可以自动计算出总 RNA 样品中核糖体条带的比例,或显示信使 RNA 样品中核糖体杂质的百分含量。更重要的是,您将获得很好的浓度估计,并且可以在许多情况下(RNA Nano 芯片实验室试剂盒)不必使用 UV 测量。利用一项标记校准功能,可以获得 高度再现性数据。因为数据是数字化的,您可以将它存储到一个数据库中或者与同一个实验室或世界各地的同事共享数据。

2.基因表达定量分析
DNA 1000 芯片实验室试剂盒与特定的(RT)-PCR 试剂盒配合使用,可用于 癌症诊断学 和 癌症研究 以及其它应用领域中的指定基因的定量分析 。通过合理的设计,这些检测可以在一个很宽的动态范围内提供定量的和精确的结果。与其它的技术相比(如实时 RT-PCR),利用多重PCR方法可在每个反应中分析更多的基因,并且具有准确、方便以及其它很多 优于凝胶电泳的优势。 请参考一个 19-plex 多重 PCR 应用实例。我们的合作伙伴 QIAGEN 和 Maxim Biotech 提供专门为 多重 PCR 应用 设计的产品。

3.比较基因组杂交的DNA质量控制
比较基因组杂交(CGH)可以同时检测基因组中多个位点的基因拷贝变化,从而为肿瘤研究、发育异常或开发诊断和治疗靶点提供了一个重要的研究手段。充分利 用该项技术进行人类疾病研究需要在基因组杂交之前对DNA实行质量控制。安捷伦2100芯片生物分析系统在比较基因组杂

4. 芯片流式细胞术 — 轻松获取基于细胞的荧光检测参数
安捷伦 2100 芯片生物分析仪的细胞荧光检测芯片实验室试剂盒以及细胞检测扩展为所有从事细胞研究的科学家提供了简单的流式细胞术检测,藉此安捷伦 2100 芯片生物分析仪成为业内运行 RNA、DNA、蛋白质和细胞分析的唯一平台。在安捷伦 2101 芯片生物分析仪所具有的电动力液体流动和电泳分离功能的基础上,细胞检测扩展增加了压力驱动的微流控流动性能。新增的性能将 2100 芯片生物分析仪的芯片实验室应用系统从电泳分离检测扩展到自动的双色流式细胞术检测。这样很宽范围内的细胞参数和多种细胞样品都能得到测量,具有荧光显微 镜操作的方便性,流式细胞器的信息质量还能满足您的期望值。简言之,6 个容量均为 10μl 的样品,每个样品带有 20,000 个预先染色的细胞,被装载到一个芯片上,每个样品分别含有 750 个细胞位于两个通道内,25 分钟之内即可测得荧光强度。

5. 分析蛋白质样品的更好途径
您是否从事表达重组蛋白质、纯化蛋白质,稳定性研究或者抗体研究?利用和Caliper Life Sciences, Inc共同开发的实验室芯片技术,增强型蛋白质 200 和增强型蛋白质 50 芯片实验室试剂盒为各类样品的分析提供了一种轻松快捷的途径。与安捷伦 2100 芯片生物分析仪配合使用,每个芯片能够提供10种不同蛋白质样品的大小、纯度以及浓度信息。只需要简单地加入蛋白质样品,启动芯片运行,然后观察实时数据 显示即可。不到30分钟就可以完成检测。不需要传统 SDS-PAGE技术所需的凝胶和缓冲液、冗长的染色或者成像步骤。蛋白质实验室芯片试剂盒以其小巧的包装提供实验所需的所有试剂。因为数据是数字化的, 所以您可以将它存储到一个数据库中或者与不同实验室和世界各地的同事共享。


特点:

    * 快速获得结果,30 分钟内完成 10 个样品的自动化分析
    * 不需要手动染色和脱色步骤,所有的程序集中到一个步骤中实现
    * 检测精确度提高,预包装的试剂和标准化检测方法可产生高度可再现结果
    * 可分析多种蛋白质样品,细胞消化液、柱层析组分、抗体和纯化的蛋白质
    * 样品消耗量最低,每个分析仅需要4 μl 蛋白质样品
    * 样品对照快速容易,只需单击重叠分析,具有图象缩放功能
    * 数字数据易于归档和存储,与他人共享数据,输出数据用于发表或者进行陈述
    * 在一个检测中可以定性和定量分析,可以进行绝对和相对定量(半定量)
    * 多种数据显示选项,结果可以类似凝胶的影像、电泳图谱以及表格格式显示
    * 数字操作,可对实验进行精细的分析