Beijing solarbio science ＆technology CO.,LTD

北京索莱宝科技有限公司  张净花  010-56371206

北京索莱宝科技有限公司  张净花  13426459985

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产品基本信息

货号：D1600

规格：50T/ 100T

保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。

试剂盒内容：

产品简介:

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取细菌基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效专一吸附DNA. 可*大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DN**段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、 PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

操作步骤:

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、取细菌培养液1ml，12000rpm离心1min.，尽量吸除上清。

2、向菌体中加入200ul溶液A，振荡或用移液器吹打使菌体充分悬浮（如果是革兰氏阳性菌，可在此步骤加入终浓度为20mg/ml的溶菌酶），向悬浮液中加入20ul的RNase A (10mg/ml)，充分颠倒混匀，室温放置15-30min。

3、向管中加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml)，充分混匀，55℃消化30-60min，消化期间可颠倒离心管混匀数次，直至样品消化完全为止，此时可见菌液呈清亮粘稠状。

4、向管中加入200ul溶液B，充分颠倒混匀，如出现白色沉淀，可于75℃放置15-30min，沉淀即会消失，不影响后续实验。如果溶液未变清亮，说明样品消化不彻底，可能会导致DNA的提取量以及纯度降低，还可能堵塞吸附柱。

5、向管中加入200ul无水乙醇，充分混匀，此时还可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入到吸附柱中，静置2min。

6、12000rpm离心2min. 弃废液，将吸附柱放入收集管中。

7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

8、向吸附柱中加入600ul漂洗液， 12000rpm离心l min， 弃废液，将吸附柱放入收集管中。

9、12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验如酶切、PCR等。

10、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心1min。

11、离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min ，12000rpm离心2 min，即可得到高质量的细菌基因组DNA。

注意事项:

1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DN**段较小且提取量下降。

2、若试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响提取效果。

3、如果实验中的离心步骤出现柱子堵塞的情况，可适当延长离心时间。

4、洗脱缓冲液的体积*好不少于50ul，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)， pH值低于7. 0会降低洗脱效率。DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

5、 DNA浓度及纯度检测：得到的基因组DN**段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 回收得到的DN**段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1.0相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。OD260/0D280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

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相关文献：

《Apatite nanoparticles mediate intracellular delivery of trehalose and increase survival of cryopreserved cells》 作者:Bin Wang,Gaoli Liu,Vasudevan Balamurugan,Yulong Sui,Guannan Wang,Yisheng Song,Qing Chang 期刊:Cryobiology 影响因子:2.141 PMID:30458174
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu  期刊:Cell Death & Disease 影响因子:5.959 PMID:30850587

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公司简介：

    北京索莱宝科技有限公司始创于2000年，是一家集产品研发、生产、销售、服务于一体的大型高科技生物企业。

    公司总部坐落于北京中关村科技园区，拥有1200平米研发生产中心，2000平米仓储基地，并配有先进的物流系统。同时在全国30多个省市设有分公司及直销、分销机构。服务网络覆盖全国，是国内*大的生命科学研发试剂供应商之一。并通过阿里巴巴国际网站将产品输入美、日、欧等发达国家，得到了国际市场的高度认可。

    目前公司提供的产品近万种，超过5000种常备现货，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等相关领域，并不断推陈出新扩充种类，为用户提供*优秀、*专业的产品。

    公司拥有数十名由博、硕士组建的专业研发技术团队，并聘请了众多国内知名专家担任技术顾问。严格按照GMP和ISO9000标准生产和管理，致力于为用户提供*先进的试剂，*完善的解决方案，致力于打造国际一流的民族品牌。

    “为科研服务，为生命尽责”。是每一个索莱宝人发自内心的服务理念。

    同时，我们建立了一套先进的企业-高校合作模式，共同利用彼此平台和优势，互通有无，并为高校学生提供各项实验技能培训，实现双赢。此时，我们也期待能与更多科研单位深入合作，共同为中国生命科学研究的发展而努力，互惠共赢。

    Solarbio品牌的诞生，是中国民族企业在生命科学领域的一次大胆挑战，面对几乎被外国企业垄断的市场，面对严酷的竞争环境，索莱宝人依然坚定不移的走自主品牌战略，立足国内，放眼全球，为中国生命科学产业的发展默默的付出自己的努力。同时，我们也相信，不久的未来中国民族生物企业也一定能够屹立于世界*高端！